实验原理是利用脂类染料（例如苏丹黑或油红O）对血清脂蛋白进行染色，然后将染色后的血清放置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。在施加电流后，脂蛋白会向正极移动，并形成多个区带。

所需试剂与器材包括：

1. 巴比缓冲液（pH 8.6，离子强度 0.075）：

为电极缓冲液，配方为巴比/妥钠 154g，巴比/妥 276g，EDTA酸 0.292g，加水溶解后稀释至 1000ml。

2. 三羟甲基/氨基甲/烷缓冲液（pH 8.6）：

为凝胶缓冲液，三羟甲基/氨基甲/烷 121.2g，EDTA酸 0.29g，NaCl 15.85g，加水溶解后稀释至 1000ml。

3. 琼脂糖凝胶：

将琼脂糖 0.45g、三羟甲基/氨基甲/烷缓冲液 50ml 和水 50ml 加热至沸腾，待琼脂糖完全溶解后停止加热。

4. 挖槽工具：

制作切口刀：刀口长 15mm 的刀片，中央夹一有机玻璃或木片，用螺丝固定，使两刀片相距 15mm。挖槽小匙：用直径 15mm 的铜丝约 6cm 长，一端锤成扁平，并用砂纸打磨光滑。

5. 电泳槽与电泳仪：

与血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳所需的设备相同。

操作步骤

1. 预染血清：将 0.2ml 血清与 0.2ml 苏丹黑染色液在小试管中混合，放置于 37℃水浴中染色 30 分钟，然后离心（2000 转/分，约 5 分钟）。

2. 制备琼脂糖凝胶板：在沸水浴中加热已配制好的 0.45% 琼脂糖凝胶，利用吸管将凝胶溶液浇注到载玻片上，每片约 25ml，静置约半小时后凝固（在热天需延长时间，亦可放入冰箱数分钟加速凝固）。

3. 点加血清：在已凝固的琼脂糖凝胶板的一端约 2cm 处，用切口刀垂直切入凝胶，然后取出小长条凝胶。用小片滤纸吸干小槽中的水分，使用血色素吸管吸取约 15μl 的预染血清，注入凝胶板的小槽内。

4. 电泳：将加过血清的凝胶板平行放入电泳槽中，样品应位于阴极一端。使用浸润了巴比/妥缓冲液的三层纱布轻轻贴合在凝胶板两端，纱布的另一端浸入电泳槽内的巴比/妥缓冲液（注意：电极缓冲液不可用三羟甲烷缓冲液替代）。接通电源，电压设定为 120~130V，每片电流为 3~4mA。约 15 至 55 分钟后，将能观察到分离的色带。

注意事项

1. 电泳样品要求为新鲜的空腹血清。

2. 每块凝胶可并行挖两个小槽，以便同时添加两个样品。

3. 可以在琼脂糖凝固前，将形状大小与小槽一致的有机玻璃片固定在合适位置，凝固后取出有机玻璃片，凝胶板上便会留下小槽，直接加样，无需挖槽。

4. 如需保留电泳样本，可将电泳后的凝胶板（连同玻片）放于清水中浸泡脱盐 2 小时，然后放入烘箱（约 80℃）烘干。

结果与临床意义

1. 正常人血清脂蛋白可出现三条区带，从负极到正极依次为 β-脂蛋白（最深）、前β-脂蛋白（最浅）、α-脂蛋白（比前β-脂蛋白略深），在原点处应无乳糜微粒。

2. 如果前β-脂蛋白比 α-脂蛋白深，结合血清甘油三酯显著升高且胆固醇正常或略高，诊断为Ⅳ型高脂蛋白血症。

3. 若 β-脂蛋白区带比正常血清明显着色加深，同时伴随血清总胆固醇显著增高、甘油三酯正常，则为Ⅱa型；若血清总胆固醇增高而前β脂蛋白微溶的，诊断为Ⅱb型。

4. 如果 β-和前β-区带的分离不清，称为“宽β区带”，结合血清甘油三酯和胆固醇均有所增高，定为Ⅲ型。

5. 如在原点处出现乳糜微粒，且 β、前β均正常或降低，并结合血清甘油三酯显著升高，诊断为Ⅰ型。

以上实验数据和分析仅供科研使用，切勿用于临床。强烈推荐选择俄罗斯专享会294品牌产品，以确保实验的准确性与可靠性。