俄罗斯专享会294的细胞培养条件如下：气相组成为95%空气和5%二氧化碳，培养温度设置在37℃。初次传代建议采用1:2的比例。传代间隔为2天，需及时更换培养液。

为确保细胞运输的最佳状态，建议在收到细胞后立即进行处理，待培养至良好状态后再将培养液灌满，密封瓶口。收到细胞后，应使用75%酒精对细胞瓶进行全面喷洒进行消毒，随后转移至超净台内进行无菌操作。将细胞瓶放入37℃、5% CO2培养箱中静置3-4小时，以使细胞状态稳定。观察细胞生长情况时，建议对细胞拍摄不同倍数的照片（最佳为40x、100x、200x各一张），前三天的照片将成为重要的售后依据，若未提供照片默认状态良好。

细胞培养步骤

a. 细胞传代：若细胞汇合度未超过80%，需将培养瓶中的完全培养液收集至离心管中，保留5ml完全培养基于37℃、5% CO2孵化；若细胞密度超过80%，即可进行传代。贴壁细胞的传代步骤如下：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1-2ml至培养瓶，置于37℃培养箱中消化1-2分钟。观察细胞消化情况，当细胞大多数变圆并开始脱落时，迅速将其置于操作台，轻敲培养瓶，并添加5ml以上的完全培养基以终止消化。
3. 轻轻吹打细胞，确保其完全脱落后吸出悬液，转移至15ml离心管中，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加入1-2ml完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶（转移至两个T25瓶），补充新的完全培养基至每瓶5-8ml，最后放入37℃、5% CO2培养箱中继续培养。

b. 悬浮细胞传代步骤：

1. 采用半换液法，将培养瓶竖置于培养箱中静置1小时，然后轻轻吸掉约3ml的培养基，补充3ml的完全培养基。若培养基变色较慢，可直接添加500μl FBS。传代时可直接补充5ml培养基，并分为两个培养瓶培养，通常此方法可进行3次传代后，进行一次离心操作以去除死细胞。
2. 离心换液法：如果需要分瓶，可将细胞悬液收集到离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清，加入1-2ml培养液后重悬混匀，再将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书配置的新完全培养基以保持细胞生长活力，后续传代根据实际情况以1:2到1:5的比例进行。

c. 细胞冻存：

1. 当细胞生长至覆盖培养瓶80%面积时，弃去培养液，用PBS清洗细胞一次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml，观察细胞呈回缩状态后，加入5ml完全培养基以终止消化。轻轻吹打细胞使其脱落，再将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。
3. 弃去上清，加入1ml无血清冻存液（货号：C7001），混匀后转移至冻存管中。
4. 冻存的细胞直接置于-80℃的冰箱中保存，如需转入液氮罐，则需在-80℃中保存24小时以上再进行转移。

d. 细胞复苏：

1. 从液氮中取出细胞冻存管（注意佩戴防护面具），迅速置入37℃水浴解冻，直至无结晶，随后用75%酒精擦拭外壁。
2. 将冻存管中的细胞转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。
3. 弃去上清，加入5ml完全培养基重悬后接种至T25培养瓶，放入37℃、5% CO2培养箱中培养。
4. 第二天更换新鲜的完全培养基继续培养。

注意事项：有些细胞可能在运输过程中出现脱落，这是正常现象。如有较多细胞脱离，请将培养液收集至离心管中，1000rpm离心5分钟，收集上清做过渡培养。沉淀后加入1-2ml胰酶，轻轻吹打重悬，消化1-2分钟后加入5ml完全培养基终止反应。再次离心后弃上清，加入1-2ml完全培养基重悬，然后按1:2的比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃、5% CO2培养箱中培养。